Procédure PF6AQ111

Fiche opératoire annexe n°1 :

Nomenclature :

Chapitre N° :

Analyse N° :

Coefficient : B70 (B130 si TSH + T4 L), cf règles de nomenclature.

A) Méthode d'analyse :

1) Description et principe

Méthode de dosage automatisée par immuno-enzymofluorescence sur automate Stratus.

Le dosage de la TSH us est basé sur une méthode sandwich à trois sites. L'échantillon clinique à doser est déposé au centre d'un carré de papier en fibres de verre où il réagit avec un anticorps monoclonal anti-TSH immobilisé dirigé contre un site antigénique original de la molécule entière de TSH. Après une courte incubation, on ajoute un conjugué formé d'un mélange de deux anticorps monoclonaux anti-TSH couplés à une enzyme, dirigés contre des sites antigéniques distincts de la molécule entière de TSH. Pendant la seconde période d'incubation, le conjugué réagit avec le complexe anticorps-TSH, pour former un sandwich anticorps - antigène - anticorps marqué. Une solution de lavage contenant le substrat est ajoutée ce qui a pour double effet d'initialiser la réaction enzymatique et d'éluer le conjugué non lié en excès de la zone de lecture. La vitesse de la réaction enzymatique du conjugué fixé mesurée par fluorimétrie frontale de surface est directement proportionnelle à la concentration de TSH présente dans l'échantillon. L'analyseur renferme un microprocesseur qui effectue le calcul de l'activité de la TSH exprimée en UI/L.

2) Obligations techniques prévues dans les arrêtés fixant la nomenclature des actes de Biologie Médicale.

Il n'y a aucune obligation concernant le dosage de la TSH.

3) Méthode de référence

Il existe un matériau de référence : seconde préparation internationale de l'OMS référence IRP 80/558.

4) Documentation relative à l'analyse

Une notice est disponible dans chaque coffret de réactifs.

B) Réactifs utilisés

* Trousse UTSH DADE de 120 tests unitaires

* N° d'enregistrement à l'Agence du Médicament

* Les réactifs sont stockés dans le réfrigérateur de la paillasse. La péremption est indiquée par le

fabricant.

* Noter la date d'ouverture au marqueur sur le coffret. Pour la durée de conservation après

ouverture, lire la notice insérée dans le coffret pages 8 et 9.

C) Consommables :

Utilisation de cupules de 500 µl pour le caroussel porte-échantillons.

D) Résultats :

1) Valeurs de référence : 0,2 à 4,5 mUI/L.

2) Validation analytique :

a) L'exécution de l'analyse doit s'effectuer dans les conditions opératoires prévues conformément

à la procédure opératoire relative à l'utilisation du Stratus, PF6AQ1.1.

b) Vérifier l'exactitude des valeurs obtenues pour les contrôles de qualité interne.

c) La limite de détection est de 0,05 mUI/L. Au-delà de 50 mUI/L, diluer les sérums au 1/2 dans

l'échantillon de calibrage A (point zéro).

d) Conduite à tenir devant des résultats anormaux :

* Comparer avec les antériorités éventuelles

* En l'absence d'antériorité, vérifier le résultat sur l'OPUS BEHRING et effectuer un

nouveau dosage sur le Stratus en cas de discordance.

* Observer le résultat de la T4 L et sa cohérence avec celui de la TSH :

Lors de pathologies thyroïdiennes, on observe en général :

- En sachant qu'une TSH normale signifie à 99 % une fonction thyroïdienne normale en

l'absence de traitement.

thyroïdienne d'origine centrale.

Malheureusement, les discordances entre la TSH et les hormones thyroïdiennes périphériques T4 L et T3L sont fréquentes et rendent l'interprétation délicate donc :

* Obtenir des renseignements cliniques et rechercher :

- Les pathologies diminuant la TSH (T4 L normale) :

Altération de l'état général

Dépression majeure

Réanimation

Maladies graves non thyroïdiennes (cancer)

Stress - grossesse

Hyperthyroïdie infra-clinique ou adénome toxique

- Un traitement médicamenteux diminuant la sécrétion de TSH :

Amiodarone

Glucocorticoïdes

Dopaminergiques

Antagonistes de la Sérotonine

Opiacées

Somatostatine et Somatotropine

T4 L en traitement freinateur des cancers thyroïdiens

- Un traitement médicamenteux augmentant la sécrétion de TSH :

Amiodarone

Métoclopramide (Primpéran)

Sulpiride

Noradrénaline

3) Expression des résultats : en mUI/L

Pour les TSH effondrées, rendre < 0,05 mUI/L

Diluer systématiquement au 1/2 les TSH > 50 mUI/L

4) Saisie des résultats numériques sur l'informatique GESPOWER

5) Archivage

Les résultats sont conservés sur les listes de travail rangées dans le classeur des bilans thyroïdiens pendant 1 an puis ultérieurement dans les boites d'archivage situées dans l'armoire métallique.